基因信息

基因名
IL2RG

品系描述

NOD背景下Prkdc純合突變:Prkdc(protein kinase, DNA-activated, catalytic polypeptide)基因主要編碼DNA依賴性蛋白激酶(DNA-PK)的催化亞基,是參與雙鏈DNA斷裂修復、免疫球蛋白和T細胞受體可變(V)、多樣性(D)、連接(J)區段重組的重要基因。Prkdcscid突變代表嚴重的聯合免疫缺陷,表現為缺失T、B細胞,無法介導細胞和體液免疫,不排斥同種和異種移植。無功能T細胞和B細胞,NK細胞活性低,沒有溶血補體活性,骨髓發育缺陷。血清免疫球蛋白(Ig)泄漏率非常低,非常適合同種和異種腫瘤移植。 IL2rgnull突變:Interleukin-2受體gamma鏈(IL-2Rγc,又稱CD132)是具有重要免疫功能的細胞因子Il2、Il-4、Il-7、Il-9、Il-15和Il-21的共同受體亞基,該基因敲除後的小鼠機體免疫功能嚴重降低,通過多種受體阻斷細胞因子信號傳導,導致功能性NK細胞缺陷。 M-NSG嚴重免疫缺陷小鼠,缺失成熟T、B、NK細胞,可高效地植入人CD34+造血幹細胞(HSC)、外周血單核細胞(PBMC)、病人來源異種移植物(PDX)或成體幹細胞和組織,基本上可以植入人體免疫系統,是研究人體免疫功能,傳染病,糖尿病,腫瘤學和幹細胞生物學的重要免疫缺陷小鼠,是目前國際公認的免疫缺陷程度較高、較適合人源細胞或組織移植的工具小鼠。
應用領域:免疫及造血系統研究,腫瘤或細胞移植等。

驗證數據

表型分析

T、B、NK 細胞 FACS 檢測

image.png

圖 1.M-NSG 小鼠脾臟中 T、B 和 NK 細胞缺失。取 BALB/c、NOD-scid 和 M-NSG 小鼠的脾臟細胞,通過 FACS 對其中 T、B 和 NK 細胞的組成進行分析 (A) 並進行統計對比 (B)


image.png

圖 2.M-NSG 小鼠血液中 T、B 和 NK 細胞缺失。取 BALB/c、NOD-scid 和 M-NSG 小鼠的外周血,通過 FACS 對其中 T、B 和 NK 細胞的組成進行分析 (A) 並進行統計對比 (B)


M、MΦ、DC 細胞 FACS 檢測

image.png

圖 3.M-NSG 小鼠脾臟中單核細胞、巨噬細胞和 DC 細胞比例。取 BALB/c、NOD-scid 和 M-NSG 小鼠的脾臟細胞,通過 FACS 對其中單核細胞、巨噬細胞和 DC 細胞的組成進行分析 (A) 並進行統計對比 (B)


image.png

圖 4.M-NSG 小鼠外周血中單核細胞、巨噬細胞和 DC 細胞比例。取 BALB/c、NOD-scid 和 M-NSG 小鼠的外周血,通過 FACS 對其中單核細胞、巨噬細胞和 DC 細胞的組成進行分析 (A) 並進行統計對比 (B)


image.png

圖5. M-NSG小鼠生長曲線(n=60)


image.png

圖6. M-NSG小鼠血清抗體亞類檢測(雄性,8周齡)。


image.png

圖7. M-NSG 各組織病理學檢測。A:除脾臟和胸腺外,其他組織未見明顯異常,包括:腦、視網膜、脊髓、心臟、肝、肺、腎、小腸、大腸、胃、唾液腺、胰腺、卵巢、子宮、睾丸、附睾、骨骼肌、皮膚和棕色脂肪(雌性,6周齡);B,C: M-NSG小鼠的脾臟缺乏白髓,淋巴細胞減少(6周齡)。


表1. M-NSG小鼠血常規檢測

image.png



表2. M-NSG小鼠血生化檢測

image.png


CDX/PDX成瘤及藥效驗證

image.png

圖8. A549 肺腫瘤細胞(A)或 Raji 淋巴瘤細胞(B)在 M-NSG 小鼠上的成瘤驗證。


基於 M-NSG 小鼠成功建立的 CDX 模型image.png


image.png


圖9.利用淋巴癌(Raji)CDX模型進行抗人CD47抗體藥效驗證實驗。


image.png

圖10. 利用肺癌(A549)CDX模型進行CAR-T藥效驗證實驗。

image.png

圖11. 移植CAR-T的M-NSG小鼠體內的GVHD研究。


image.png


圖12. 肝癌PDX在 M-NSG 小鼠上的成瘤驗證。


人源免疫系統重建模型 

利用重度免疫缺陷M-NSG小鼠可以通過移植人源外周血細胞、造血幹細胞等,實現在小鼠體內重塑人源免疫系統,為免疫學、腫瘤學及人類傳染疾病等研究提供有力工具。


PBMC人源化小鼠

image.png

Hu-PBMC模型,或者被稱為Hu-PBL(perihperal blood lymphocyte, PBL)模型,是一種構建較為簡單和經濟的免疫系統人源化小鼠模型。Hu-PBMC模型的移植方式主要有腹腔注射與尾靜脈注射,通常以4-6周齡的M-NSG小鼠作為移植受體,PBMC移植/接種量通常在5~10*10^6/小鼠。該模型常被用於研究人效應T細胞的活化以及評估免疫抑制藥物。


Hu-PBMC模型的供體篩選


image.png

圖13.  M-NSG小鼠中進行Hu-PBMC重建的供體篩選。


image.png圖14.流式分析Hu-PBMC模型外周血淋巴細胞亞群。將人PBMCs(5E6)靜脈注射M-NSG小鼠(雌性,6-8周齡,n=4)。植入human PBMCs後取不同時間點的小鼠血液進行流式細胞分析。


image.png圖15. 利用骨髓瘤(H929)Hu-PBMC模型進行體內藥效研究。


image.png

圖16. 利用乳腺癌(MDA-MB-231)Hu-PBMC模型進行體內藥效研究。


HSC人源化小鼠

image.png

Hu-HSC模型,也叫hu-CD34+,或叫hu-SRC(scid-repopulatingcell),已經被廣泛應用於研究人類造血發育、細胞介導的免疫反應以及HIV和EBV等病毒感染性疾病中。 其構建方式是將來自人臍帶血、骨髓、G-CSF激活的外周血或胎肝的人CD34+ HSCs通過靜脈內(i.v.)或股骨內(i.f.)注射到成年免疫缺陷小鼠M-NSG中,得到的小鼠可以產生多種造血幹細胞。


image.png

圖17.流式分析Hu-HSC模型外周血淋巴細胞亞群。將人HSC細胞(1E6)靜脈注射M-NSG小鼠(雌性,6周齡,n = 8)。植入huamn PBMC後取不同時間點的小鼠血液進行流式細胞分析。


image.png

圖18. 利用乳腺癌(MDA-MB-231)Hu-HSC模型進行體內藥效研究。


發表文獻

Peptide Self-Assembly Nanoparticles Loaded with Panobinostat to Activate Latent Human Immunodeficiency Virus
來源雜誌:J Biomed Nanotechnol

SH3RF3 promotes breast cancer stem-like properties via JNK activation and PTX3 upregulation
來源雜誌:NAT COMMUN

A chimeric antigen receptor with antigen-independent OX40 signaling mediates potent antitumor activity
來源雜誌:SCI TRANSL MED

Chemokine Receptor CCR2b Enhanced Anti-tumor Function of Chimeric Antigen Receptor T Cells Targeting Mesothelin in a Non-small-cell Lung Carcinoma Model
來源雜誌:Front. Immunol

Bcl-2 Enhances Chimeric Antigen Receptor T Cell Persistence by Reducing Activation-Induced Apoptosis
來源雜誌:Cancers

4-1BB Signaling Boosts the Anti-Tumor Activity of CD28-Incorporated 2nd Generation Chimeric Antigen Receptor-Modified T Cells
來源雜誌:Frontiers in Immunology

T cell receptor β-chain-targeting chimeric antigen receptor T cells against T cell malignancies
來源雜誌:nature communications

A Chimeric Conjugate of Antibody and Programmable DNA Nanoassembly Smartly Activates T cell for Precise Cancer Cell Targeting
來源雜誌:A Journal of the Gesellschaft Deutscher Chemiker

Therapeutic strategies targeting uPAR potentiate anti-PD-1 efficacy in diffuse-type gastric cancer
來源雜誌:SCIENCE ADVANCES

Exosome-derived circCCAR1 promotes CD8+T-cell dysfunction and anti-PD1 resistance in hepatocellular carcinoma
來源雜誌:Molecular Cancer

An armed oncolytic virus enhances the efficacy of tumor-infiltrating lymphocyte therapy by converting tumors to artificial antigen-presenting cells in situ
來源雜誌:Molecular Therapy

Therapeutic strategies targeting uPAR potentiate anti–PD-1 efficacy in diffuse-type gastric cancer
來源雜誌:SCIENCE ADVANCES

T cell receptor β-chain-targeting chimeric antigen receptor T cells against T cell malignancies
來源雜誌:nature communications

Chemokine Receptors CCR6 and PD1 Blocking scFv E27 Enhances Anti-EGFR CAR-T Therapeutic Efficacy in a Preclinical Model of Human Non-Small Cell Lung Carcinoma
來源雜誌:International Journal of Molecular Sciences


參考文獻

T cell receptor β-chain-targeting chimeric antigen receptor T cells against T cell malignancies
來源雜誌:nature communications


你也可能感興趣

Tamoxifen誘導Cre-ERT2小鼠 使用指南

Cre-ERT2在無Tamoxifen誘導的情況下,在細胞質內處於無活性狀態;當Tamoxifen誘導後,Tamoxifen的代謝產物4-OHT(雌激素類似物)與ERT結合,可使Cre-ERT2進核發揮Cre重組酶活性。

查看
【小鼠大學問】基因工程小鼠的命名規則

常見的基因工程小鼠可以分為兩種命名方式,包括基因定點修飾的小鼠命名,比如:敲除、敲入、點突變等等,和隨機轉基因的小鼠命名。

查看